青黴素適用於敏感細菌所致各種感染 ，如膿腫 、菌血症 、肺炎和心內膜炎等 。其中青黴素為以下感染的首選藥物 ：1.溶血性鏈球菌感染 ，如咽炎 、扁桃體炎 、猩紅熱 、丹毒 、蜂窩織炎和產褥熱等 。2.肺炎鏈球菌感染如肺炎 、中耳炎 、腦膜炎和菌血症等 。3.不產青黴素酶葡萄球菌感染 。4.炭疽 。5.破傷風 、氣性壞疽等梭狀芽孢桿菌感染 。6.梅毒（包括先天性梅毒） 。7.鈎端螺旋體病 。8.回歸熱 。9.白喉 。10.青黴素與氨基糖苷類藥物聯合用於治療草綠色鏈球菌心內膜炎 。青黴素亦可用於治療 ：1.流行性腦脊髓膜炎 。2.放線菌病 。3.淋病 。4.奮森咽峽炎 。5.萊姆病 。6. 鼠咬熱 。7.李斯特菌感染 。8.除脆弱擬桿菌以外的許多厭氧菌感染 。風濕性心臟病或先天性心臟病患者進行口腔 、牙科 、胃腸道或泌尿生殖道手術和操作前 ，可用青黴素預防感染性心內膜炎發生 。